- 专注于一点·慢慢谨慎的做事·彻底地完成
- 是日已过，命亦随减，如少水鱼，斯有何乐！当勤精进，如救头燃，但念无常，慎勿放逸！
- 心包太虚，量周沙界。
- 动静不失其时。
- 正位凝命，旷怀笃行。
- 夕惕若厉。
- 心无所住，一期一会。
- 克己·慎独。
- 行云流水，任意所致。
- 十力·精诚。
- 炼器于身。
- 学以聚之，问以辨之，宽以居之，仁以行之。
Buffer
piranha清洗液
| Type | Ratio | Temp | Time |
|---|---|---|---|
| Acid | H2SO4 : H2O2(30%) = 7:3 | 60-90 C | 10-30 mins |
| Alkali | H2O: NH3·H2O: H2O2(30%) = 5:1:1 | 60 C(or 75C ) | 10-15 mins |
10mM PBS配方
按下表配方于1L水中溶解定容，用0.22um的水膜抽滤，pH大概7.31左右，接近理论值7.4：
| Material(MW) | Weight | Mol mass |
|---|---|---|
| Na2HPO4(141.96) | 1.44g | 10.1mM |
| or Na2HPO4·12H2O(358.14) | 3.63g | 10.1mM |
| KH2PO4(136.09) | 0.27g | 1.98mM |
| NaCl(58.44) | 8g | 136.89mM |
| KCl | 0.2g |
10mM HBS配方（受多价盐影响小）
按下表配方于1L水中溶解定容，用0.22um的水膜抽滤，pH大概5.5，需加NaOH调pH：
| Material(MW) | Mol mass | Weight |
| HEPES(238.30) | 0.01M | 2.383g |
| NaCl(58.44) | 0.15M | 8.766g |
其它常见缓冲液
- MES
- MOPE（易受多价盐影响）
常用药品
- 正常人血清：SoLarbio,5mM，Lot.No.20160912.Cat.No.Sl010
- CaCl2·2H2O(MW=147.02):100mM=14.70mg/ml(无规则水合结构)
- MgCl2·6H2O(MW=203.30):100mM=20.33mg/ml(六配位八面体水合结构)
仪器
纳米粒度及zeta电位分析仪
- 如果样品尺寸分布比较广，则可用激光衍射法。
- 散射光强可以向数量百分比或体积百分比换算（分散剂必须准）。
- 溶质的折光指数和吸收率对折算重要，若不折算则不重要。
- 测试过程中光强误差应在5%以内。
- 测zeta电位的过程中，单项模式加电压的时间比较短，常规模式加电压的时间长一些。
- zeta potential的绝对值大于30mV被业界认为是稳定。
- correlation function图的纵坐标截点值应在0.8-1之间。
经验
- cystein会形成二硫键，导致无法吸附，所以在配置溶液时会有一步还原，加入DDT然后过柱子，或者加tris(1-carboxyethyl)phosohine hydrochloride （TCEP, 10mM， MW=286.65）。后者不用过柱子，但需要现配现用且避光混合1h。
- 组装时加0.5M的盐可以有效屏蔽掉electrostatic interaction，要不可能有些肽因为electrostatic interaction而难溶。
- 络合常数可以与结合能（用ITC测）互相换算，低pH下络合常数通常很低，常pH下络合常数则较高。
- pI小于pH带负电，如PBS中BSA，pI大于pH带正电，如PBS中lysozyme。
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