预防非特异性吸附
- 摸索分析物和配体的最佳浓度。
- 优化反应缓冲液，包括摸索合适的pH条件；提高盐离子浓度，如NaCl最高至500 mM（需考虑样品的特定生理特性）；增加表面活性剂浓度，非离子型如Tween-20，最高至0.05％。
- 增加封闭步骤，在反应缓冲液中加入BSA ，浓度 1-2%；如果BSA有干扰，可以用酪蛋白，PEG，明胶或脱脂奶粉替代，或采用其他商品化的封闭缓冲液。不加封闭步骤时，可能有非常强的NSB（非特异性吸附）信号，导致结合信号基本都被掩盖了。如果对反应缓冲液进行优化，添加了0.1% BSA和0.05% Tween 20,并且在结合反应前，增加了300s的封闭步骤，很好的消除了NBS的影响，获得了可用的数据。优化反应缓冲液和增加封闭步骤以消除NSB影响（图见Chinese Journal of New Drugs 2016,25(16)：1861-7）
- 固化物和分析物对换。即固定之前的分析物，分析之前的固化物。
- 尽可能去除分析物中的杂质。可以对样品进行高速离心处理，尽可能提高分析物的纯度和缓冲试剂的质量。
- 在分析处理数据时，通过设计对照组，进行非特异信号的扣除。有一个重要前提是NSB信号不应超过总结合信号的10-25％（用户自己定义标准）
- 更换其他种类的生物传感器测定。比如由NTA传感器换为SA传感器。
- 当使用SA/SAX/SSA生物传感器时的NSB，可以在生物素化的捕获分子固化到传感器上后,用biocytin 封闭残留的链霉亲和素位点。
- 当使用血清样品时的NSB，可以在血清样品结合之前使用相同浓度的阴性血清作为基线。
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